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简单介绍菠萝蛋白酶三种生产工艺

菠萝蛋白酶是从热带植物菠萝中提取精制而成的一组巯基水解蛋白酶,菠萝蛋白酶主要存在于菠萝果实、芽、叶、茎中,分子量为33000,菠萝蛋白酶的水解蛋白的活性较木瓜蛋白酶高十倍以上,特别是在医药工业中,可以阻止血小板凝集,纤维蛋白溶解,消炎作用,抗肿瘤作用,细胞因子和免疫调节作用,皮肤清创,促进其他药物的吸收,粘液溶解作用,帮助消化作用,促进伤口愈合,改善心血管和循环系统。菠萝蛋白酶能被很好的口服吸收,临床数据统计,在高剂量下,菠萝蛋白酶的治疗效果会更好。那么菠萝蛋白酶是通过什么方法生产出来呢?下边简单的介绍菠萝蛋白酶三种生产工艺。

菠萝蛋白酶

菠萝蛋白酶分子量为33000,水解蛋白的活性较木瓜蛋白酶高十倍以上

萝蛋白酶三种生产工艺

目前菠萝蛋白酶主要生产工艺有三种,分别为:高岭土吸附工艺、单宁沉淀工艺、超滤法浓缩有机溶剂提取工艺等三种方法。

1、高岭土吸附工艺:高岭土吸附工艺操作复杂,原材料消耗多,所需设备也多,酶活总回收率低,但产品质量较好,纯度较高,缺点是对容易对环境造成污染,增加环保成本;

高岭土吸附工艺生产要点:

1、压榨。将菠萝下脚料洗净,用压榨机压出汁 液,加入0.05%苯甲酸钠防腐,迅速过滤除杂质。2、吸附。将汁液移入吸附槽中搅拌,同时加入4%的高岭土,搅拌约20min,在10℃吸附30~60min,用虹吸排掉上清液,收集高岭土吸附物。

3、洗脱。用16%的NaOH溶液调节吸附物的pH值至7.0左右,再加入吸附质量为7%~9%的工业食盐,搅拌30min进行洗脱,然后迅速压滤,收集滤液。

4、盐析。将压滤液收集在盐析槽中,用1∶3的盐酸调节pH值至5.0左右,搅拌加入压滤液质量25%的硫酸铵,待完全溶解后,4℃过夜;然后离心,收集沉淀盐析物,即粗酶。

5、溶解。将粗酶放入溶解罐中,加入10倍水,用NaOH溶液调pH值至7.0~7.5,搅拌使其溶解,过滤除杂,收集滤液。

6、沉淀、干燥。在搅拌下用1∶3的盐酸调节上述滤液的pH值至4.0,静置1h使酶析出,用离心机分离出沉淀物,冷冻真空干燥或减压干燥即得菠萝蛋白酶精品。

流程:菠萝下脚料—>压榨—>汁液—>高岭土吸附—>吸附物—>洗脱压滤—>洗脱液

盐析—>盐析物—>离心—>湿粗酶饼—>溶解过滤—>澄清液—>沉淀—>湿酶—>干燥—>菠萝蛋白酶

菠萝蛋白酶下脚料

菠萝蛋白酶主要存在于菠萝果实、芽、叶、茎中,

2、单宁沉淀工艺

单宁沉淀工艺操作方法简单,原材料消耗少,所需设备少,缺点是酶活回收率低,同时对环境造成污染,增加环保成本;

单宁沉淀法工艺生产要点:

1、压榨。方法同前。

2、去杂质。鲜菠萝汁经过滤去杂。

3、加稳定剂。将澄清液移入生产罐中,在 搅拌条件下,加入澄清液体积0.05%的EDTA-2Na、0.06%的二氧化硫、0.02%的维生素C。

4、加单宁。立刻加入0.1%的单宁,在4℃下静置1h,离心弃去上清液,收集沉淀物。

5、洗脱、干燥。将沉淀物放入溶解罐中,加入2~3倍pH值为4.5的抗坏血酸溶液(或用1∶3的盐酸,调pH值到3),搅拌洗脱40min,然后过滤,收集滤液,减压干燥或冷冻真空干燥即得菠萝蛋白酶精品。

流程:菠萝下脚料—>压榨—>汁液—>去杂质澄清液—>加稳定剂—>稳定液—>加单宁—>单宁沉淀物—>洗脱—>滤液—>菠萝蛋白酶


3、超滤法浓缩有机溶剂提取工艺

超滤法浓缩有机溶剂提取工艺相比高岭土吸附工艺及单宁沉淀工艺操作复杂,必须有回收有机溶剂的设备精馏塔,设备一次性投资大,对工人素质要求高。另外,由于有机溶剂提取需要温度更低,使得生产成本上升。但同时,超滤透过液可作饮料添加剂,有机溶剂可回收再生产。基本上没有废物排放。可以达到清洁生产的要求,这是高岭土吸附工艺及单宁沉淀工艺无法比拟的优势!因此,综合经济效益分析与高岭土吸附工艺相当。但酶活力高、纯度高、是菠萝蛋白酶生产的新方向。

超滤法浓缩有机溶剂提取工艺要点:

1、压榨。方法同前。

2、去杂质。可用压滤法或离心法去杂质。

3、超滤浓缩。将澄清液在管式超滤设备中进行浓缩,使体积浓缩至原体积的1/5。

4、有机溶剂沉淀。将浓缩液降温至0~4℃,边搅拌边加入-20℃的95%乙醇,直至混合液中乙醇浓度为50%,静置,使酶沉淀,移出上清液,即得湿酶。

5、干燥。将湿酶在0℃下减压干燥或冷冻真空干燥即得菠萝蛋白酶精品。

流程:菠萝下脚料—>压榨—>汁液—>去杂质—>澄清液—>超滤浓缩—>浓缩液—>降温—>加有机溶剂—>沉淀—>湿酶减压干燥—>菠萝蛋白酶

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