木瓜蛋白酶是从番木瓜乳汁为原料，用于提取木瓜浆的番木瓜主要集中在广西、广东、海南等种植区域，木瓜浆经过现代工艺提纯而得木瓜蛋白酶到。木瓜蛋白酶在食品加工、饲料加工、化妆品等式业的应用日趋广泛，对其纯度要求也越来越高。东恒华道地处于木瓜集中种植区，有地域及成本优势，有多年木瓜蛋白酶生产经验，本文简单介绍木瓜蛋白酶提纯方法。

木瓜浆及木瓜浆收集是木瓜蛋白酶提取的重要一环

木瓜蛋白酶提取过程中需要注意的事项

1、食品及制革等对酶纯度要求不高的工业，适合于用单宁沉淀法工艺比较简单，原材料消耗少，所需设备简单，但酶的回收率比较低而且酶纯度不够高。化妆品成分和部分的医疗卫生产品。适用于经过盐析、结晶和重结晶后获得纯度较高的木瓜蛋白酶。要想获得纯度更高的酶用于科学实验和医疗卫生，要把上述方法与剃度洗脱法、有机溶剂沉淀法或超滤浓缩法结合起来。但这些方法都比较复杂，工人素质要求高，且设备一次性投资大。

2、木瓜蛋白酶是一种生物活性物质，易受重金属离子，如铁、铜等，或者化学药品等会引起失活，所以在生产过程中要求低温、短时、卫生，忌碱、忌强酸作用。

3、木瓜蛋白酶在生产过程中制得得单宁沉淀物，可经60℃真空干燥、粉碎后制得粗酶，适用于食品及制革等对酶纯度要求不高的工业；洗脱后酶得度高，适用于科学事业、作为化妆品成分或是医疗卫生行业。

3、木瓜蛋白酶是一种水解酶，对人体的皮肤有刺激分解的作用，所以生产人员必须穿戴工作服、工作帽、口罩、手套和胶鞋等卫生防护用品，做好生产防护工作。

5、木瓜蛋白酶是一种胶体物质，生产过程中容易产生气泡而造成损失。

木瓜蛋白酶提取流程

浆液采集（番木瓜）→浆液(过滤)→滤液(单宁法去杂质干燥)→ 粗酶制品(加半胱氨酸混合研磨)→研磨混合液(调PH后过滤)→滤液(硫酸铵和氯化钠两次盐析) →盐析物(低温半胱氨酸溶液中结晶)→结晶体(重结晶)→精酶

木瓜浆收集桶

木瓜浆收集桶

木瓜蛋白酶提取的操作方法

1、浆液的采集：番木瓜果实的浆液中富含木瓜蛋白酶,但是在果实完全成熟时,白色浆液就会逐渐减少。因此,采集浆液时应选择绿色的未成熟果。其采浆方法是：用薄不锈钢刀片沿番木瓜果实的纵线将果皮割破,深度为2-3mm，根据果实大小，每个果实可以割5-10条刀口。然后用毛笔蘸取浆液抗凝保护剂涂刷在每一条刀口上，防止由于浆液凝固而影响浆液的采集。最后,在果实外面套上一个比果实稍大的塑料袋，并将其固定在果柄处,用于收集流出的浆液。番木瓜开始采浆液后,就可以每隔5-8天,在没有刀口的部位破皮采集浆液,直到番木瓜果皮开始变黄为止。

木瓜浆

2、浆液的加工：采集的番木瓜浆液要及时加工，一般不要超过24小时。在加工时，首先在浆液中加入适量的保护剂，保护木瓜蛋白酶中的活性巯基，常用的保护剂有乙二胺四乙酸(EDTA)、亚硫酸氢钠(NaHSO3)、焦亚硫酸钠(Na2S2O5)等。然后将浆液进行过滤，除去杂质。再将浆液装入搪瓷浅盘中，浆液的深度在8-12mm为好。最后，将搪瓷浅盘装入鼓风式热风干燥箱中，在55-60℃的条件下对浆液进行热风干燥（如果条件允许，最好是采用低温真空干燥法或喷雾干燥法进行干燥）。当浆液的含水量下降至5-8%时，即可从搪瓷浅盘中取出片状的木瓜蛋白酶，再经过粉碎,即可得到木瓜蛋白酶粗品。

3、木瓜蛋白酶的精制：首先将粉碎好的木瓜蛋白酶粗品与0.04M的半胱氨酸溶液混合后进行研磨，然后将混合液的pH值调节到9.0，过滤除去不溶物。再分别用硫酸铵[(NH4)2SO4]和氯化钠(NaCl)进行两次盐析。最后在2-4℃的低温条件下，让木瓜蛋白酶在pH值为6.5的0.02M半胱氨酸溶液中结晶，再将产生的结晶体溶于蒸馏水中进行重结晶，即可得到经过精制的木瓜蛋白酶。

东恒华道地处于木瓜集中种植区，有地域及成本优势，有多年木瓜蛋白酶生产经验

木瓜蛋白酶与木瓜粉样品